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糜蛋白酶測試盒

簡要描述:糜蛋白酶測試盒 糜蛋白酶(Chymotrypsin)試劑盒 胰凝乳蛋白酶測試盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時(shí)間:2024-05-08
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詳細(xì)介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),制藥

糜蛋白酶測試盒

微量法100T/96S

注意:正式測定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

糜蛋白酶,又稱胰凝乳蛋白酶,是胰腺分泌的一種蛋白水解酶,能迅速分解變性蛋白質(zhì)。糜蛋白酶的功能與胰蛋白酶相似,但是具有分解能力強(qiáng)、毒性低和不良反應(yīng)小等優(yōu)點(diǎn)。臨床上糜蛋白酶用于痰液稀化,對膿性和非膿性痰液均有效;也用于創(chuàng)傷或手術(shù)后傷口愈合,如白內(nèi)障摘除。

測定原理:

糜蛋白酶催化ATEE水解,產(chǎn)物在237 nm有特征光吸收;通過測定237 nm 光吸收增加速率,來計(jì)算糜蛋白酶活性。

自備儀器和用品:

臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、冰和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體100mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入20 mL蒸餾水充分溶解。

粗酶液提取:

組織樣品:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即粗酶液。

測定步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到237 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二置于37℃水浴中保溫30min。

3. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,加入20μL試劑一,200μL試劑二,混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化,記為△A空白管。(從吸光值穩(wěn)定增加開始計(jì)時(shí))

4. 測定管:取微量石英比色皿/96孔板,加入20μL粗酶液,200μL試劑二,混勻于237nm測定4min內(nèi)吸光值變化,記為△A測定管。(從吸光值穩(wěn)定增加開始計(jì)時(shí))

注意:空白管只需要測定一次。

糜蛋白酶活性計(jì)算公式:

a.使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

(1)按蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶(U/mg prot)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(Cpr×V1)÷T

=2.75×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶(U/g 鮮重)=(△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(W×V1÷V2)÷T

=2.75×(△A測定管-△A空白管)÷W

W:樣品質(zhì)量(g);Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;V1:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(mL),20μL=2×10-2 mL;V2:粗酶液總體積(mL),1 mL;V反總:反應(yīng)總體積,220μL=0.22mL; T:反應(yīng)時(shí)間(min),4min。

b.使用96孔板測定的計(jì)算公式如下

(1)按蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃每毫克蛋白每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶(U/mg prot)= (△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(Cpr×V1)÷T

=2.75×(△A測定管-△A空白管)÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃每克樣品每分鐘催化吸光值增加1為一個(gè)酶活單位。

糜蛋白酶(U/g 鮮重)=(△A測定管-△A空白管) ×V反總÷(W×V1÷V2)÷T

=2.75×(△A測定管-△A空白管)÷W

W:樣品質(zhì)量(g);Cpr:粗酶液蛋白質(zhì)濃度(mg/mL),需要另外測定;V1:加入反應(yīng)體系中粗酶液體積(mL),20μL=2×10-2 mL;V2:粗酶液總體積(mL),1 mL;V反總:反應(yīng)總體積,220μL=0.22mL; T:反應(yīng)時(shí)間(min),4min。

注意事項(xiàng):

臨用前配制的試劑配置好后3天內(nèi)使用完畢。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。

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  6. 質(zhì)量保證,所有產(chǎn)品都提供售后服務(wù)。付款方式靈活。公司堅(jiān)持“一站式"服務(wù)模式,為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求。公司整合國際與國內(nèi)資源,加強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)建設(shè),提高公司內(nèi)部運(yùn)作效率,為客戶提供方便、快捷的服務(wù)。

  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運(yùn)作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價(jià)格。

糜蛋白酶測試盒




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