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維生素B1測試盒

簡要描述:維生素B1測試盒 維生素B1(Vitamin B1,VB1)試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-08
  • 訪  問  量:164

詳細介紹

品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應用領域醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),農業(yè),制藥

維生素B1測試盒

微量法100T/96S

注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義

維生素B1(Vitamin B1)是構成脫羧輔酶的主要成分,參與細胞代謝中的三羧酸循環(huán),是維持機體正常代謝必須的水溶性維生素,在生物體能量代謝中有重要的作用。

測定原理

VB1在堿性條件下還原鐵氰*鉀生成亞鐵氰*鉀,亞鐵氰*鉀與Fe3+在弱酸條件下生成普魯士藍,在704nm有特征吸收峰。

自備實驗用品及儀器

天平、研缽、離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。

試劑組成和配制

提取液:液體70mL×1瓶,4℃保存。

試劑一:液體1mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體2mL×1支,4℃保存。

試劑三:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存。

試劑五:液體3mL×1瓶,4℃避光保存。

樣本處理

  1. 組織:將樣品磨碎,按照質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入0.6mL提取液)加入提取液,60℃浸提30min,加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃,16000rpm離心10min,取上清測定(動物組織等蛋白含量較高的樣本建議離心20-30min)。

  2. 細胞:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入0.6mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);加蒸餾水0.4mL,混勻后于25℃,16000rpm離心10min,取上清測定。

  3. 血清:直接測定。

測定操作


空白管

測定管

樣品(μL)


20

試劑一(μL)

20


試劑二(μL)

16

16

試劑三(μL)

20

20

充分混勻,80℃反應10min

提取液(μL)

16

16

試劑四(μL)

44

44

試劑五(μL)

24

24

H2O(μL)

60

60

充分混勻,靜置20min,于微量石英比色皿/96孔板,蒸餾水調零,測定704nm處吸光值,記為A空白管和A測定管,△A=A測定管-A空白管。

計算公式

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.017x+0.0031,R2 = 0.9991;x為標準品濃度:μg/mL;y為△A(A測定管-A空白管)

1. 按照蛋白含量計算

VB1含量(μg/mg prot)=(△A-0.0031)÷ 0.017÷Cpr

= 58.8×(△A-0.0031)÷ Cpr

2. 按照樣本質量計算

VB1含量(μg/g鮮重)=(△A-0.0031)÷ 0.017÷(W÷V樣總)

= 58.8×(△A-0.0031)÷ W

3. 按照細胞數量計算

VB1含量(μg/104 cell)=(△A-0.0031)÷ 0.017÷(細胞數量÷V樣總)

= 58.8×(△A-0.0031)÷ 細胞數量

4. 按照液體體積計算

VB1含量(μg/mL)=(△A-0.0031)÷ 0.017

= 58.8×(△A-0.0031)

V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g

b.用96孔板測定的計算公式如下

標準曲線:y = 0.0085x +0.0031,R2 = 0.9991;x為標準品濃度:μg/mL;y為△A(A測定管-A空白管)

1. 按照蛋白含量計算

VB1含量(μg/mg prot)=(△A -0.0031)÷ 0.0085÷Cpr

= 117.65×(△A-0.0031)÷ Cpr

2. 按照樣本質量計算

VB1含量(μg/g鮮重)=(△A-0.0031))÷ 0.0085÷(W÷V樣總)

= 117.65×(△A-0.0031)÷ W

3. 按照細胞數量計算

VB1含量(μg/104 cell)=(△A-0.0031)÷ 0.0085÷(細胞數量÷V樣總)

= 117.65×(△A-0.0031)÷ 細胞數量

4. 按照液體體積計算

VB1含量(μg/mL)=(△A-0.0031)÷ 0.0085

= 117.65×(△A-0.0031)

V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質量,g


注意事項

  1. 若測定結果中吸光值超過2,請將樣本稀釋后進行測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數。

  2. 蛋白濃度較高的樣品,比如動物組織,若顯色完成后有沉淀產生,將樣本稀釋后再重新測定,并在計算公式中乘以稀釋倍數。

  3. 顯色完成后立即進行測定。

  4. 標準曲線線性范圍為0.1-10μg/mL。


上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內試劑耗材經銷代理。

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  3. 提供加急物流處理,進口貨物,最快交期1-2周。

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  5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

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  7. 公司突出創(chuàng)新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優(yōu)惠的價格。

維生素B1測試盒




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