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通用型 ECL 顯色試劑盒

簡要描述:通用型 ECL 顯色試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品.為客戶全面解決實驗、生產、開發需求,提供方便、快捷的服務。

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-09
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詳細介紹

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應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

通用型 ECL 顯色試劑盒


增強型 ECL 化學發光檢測試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體及其關聯的抗原。其原理是,蛋白質或核酸在電泳后轉移到印跡膜上,以一抗及 HRP 標記的二抗結合膜上的目的蛋白,或以HRP 標記的探針直接或間接結合膜上的核酸。洗膜后用本產品配制的 ECL 工作液,室溫孵育膜數分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于 X 光片曝光暗盒。然后轉入暗室將 X 光膠片壓在膜上曝光數秒到數小時,顯影定影后蛋白質或核酸條帶可清晰顯示在 X 光膠片上。

產品組分

A 液

B 液

運輸與保存方法

常溫運輸。頻繁使用可置于室溫保存,一年穩定;長期不用,建議置于 4 oC 保存延長效期?!咀ⅰ浚篈 液需避光保存!

操作方法(以 X 光膠片為例)

 1. 執行常規電泳、轉膜、HRP 標記抗體或者 HRP 標記核酸探針孵育、洗膜。【注】:ECL 發光液是 HRP 的顯色底物,因此檢測系統最終必須基于 HRP 酶標記抗體或者核酸探針。 

2. 最后 1 次洗膜的同時,新鮮配制發光工作液(推薦 100-200 μL 發光液/cm2 膜):分別取等體積的 A 液和B 液,混勻備用?!咀ⅰ浚喝?A 液和 B 液一定要用不同的槍頭;另建議立即使用工作液,室溫放置數小時后仍可使用但靈敏度略有降低。 

3. 用平頭鑷取出膜,搭在濾紙上瀝干洗液,勿使膜全干燥。用移液器將工作液加到膜上,使之充分接觸。室溫孵育 1-2 min,準備立即壓片曝光。4. 用平頭鑷子夾起膜,膜的下緣輕輕接觸吸水紙,去除膜上多余液體,留下少量工作液,不可讓膜全干燥。 

5. 在 X 光膠片暗盒內表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將印跡膜貼在保鮮膜上,將保鮮膜折起來全包裹印跡膜,去除氣泡和皺褶,可剪去邊緣部多余的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發光工作液。用膠帶將覆蓋印跡膜的保鮮膜固定在暗盒內,蛋白帶面向上。

 6. 暗房內取一張 X 光膠片至于包裹的膜上,壓片,曝光 30 sec-2 min,顯影定影沖洗。【注】:曝光時間需根據曝光強度做相應的調整。若是背景過高,可使用兩張 X 光膠片同時壓片。 

曝光方法 

使用 CCD 拍照:可以將膜放置于工作液中,開機后按照使用說明,將膜取出,進行拍照。另外,也可以根據情況,調整機器測量參數,提高信噪比。 

注意事項 

1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 

2)轉膜、封閉、孵育都需要避免氣泡,另外戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干凈。 

3)長時間曝光或蛋白過量,將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶模糊。 

4)某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光,應選擇高質量保鮮膜

5)避免將多張膜置于同一個洗膜盒內洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。 

6)使用肉眼可見的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶的位置和大小。 

7)使用生物素-親和素系統,避免使用牛奶封閉,可能會導致背景過高。 

8)金屬氧化物顆??赡軙斐赡ど铣霈F顆粒狀斑點,避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子,建議使用塑料的平頭鑷子。

 9)疊氮*鈉(NaN3)能抑制 HRP 活性,若回收 HRP 標記探針或者抗體應避免使用 NaN3,如必需使用勿超過 0.01%。 

10)本品無特殊毒性,按普通化學品處理。11) 本產品僅作科研用途!


問題與解決方案

通用型 ECL 顯色試劑盒

上海牧榮生物科技有限公司

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