我被六个男人躁到早上,亚洲第一AV网站,少妇的肉体AA片免费,

您好!歡迎訪問上海牧榮生物科技有限公司網站!
咨詢熱線

17621170138

當前位置:首頁 > 產品中心 > 實驗試劑 > 試劑盒 > 丙酮酸激酶(PK)測試盒

丙酮酸激酶(PK)測試盒

簡要描述:丙酮酸激酶(PK)測試盒 丙酮酸激酶(Pyruvate kinase,PK)試劑盒上海牧榮生物科技有限公司專業實驗室產品.

  • 產品型號:
  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2024-05-06
  • 訪  問  量:175

詳細介紹

品牌其他品牌供貨周期現貨
應用領域醫療衛生,化工,生物產業,農業,制藥

丙酮酸激酶(PK)測試盒

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義

PK(EC 2.7.1.40廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,催化糖酵解過程中的最后一步反應,是糖酵解過程中的主要限速酶之一,也是產生ATP的關鍵酶之一,因此測定PK活性具有重要意義。

測定原理

PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸,乳酸脫氫酶進一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+,在340nm下測定NADH下降速率,即可反映PK活性。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

試劑的組成和配制

提取液:100mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;; 

試劑二:粉劑×2瓶,-20℃保存; 

試劑三:液體10μL×2支,4℃保存; 

樣本的前處理

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣品:直接檢測。

測定步驟

  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

  2. 樣本測定

(1)試劑二的配制:臨用前取試劑二一瓶,加入9mL試劑一和1.06mL蒸餾水充分溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;現配現用。

(2)試劑三的配制:臨用前取試劑三一支,加入0.6mL蒸餾水充分溶解待用;現配現用。

(3)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、10μL試劑三和180μL試劑二,混勻,立即記錄340nm處20s時的吸光值A1和 2min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2。

PK活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、血清(漿)中PK活力的計算:

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=1608×ΔA

2、組織、細菌或細胞中PK活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=1608×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T=1608×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=3.216×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。

b.96孔板測定的計算公式如下

1、血清(漿)中PK活力的計算:

單位的定義:每毫升血清(漿)每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=3216×ΔA

2、組織、細菌或細胞中PK活力的計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=3216×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每g組織每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總)÷T=3216×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘消耗1 nmol的NADH定義為一個酶活力單位。

PK(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=6.432×ΔA

V反總:反應體系總體積,2×10-4 L;ε:NADH摩爾消光系數,6.22×103 L / mol /cm;d:96孔板光徑,0.5cm;V樣:加入樣本體積,0.01 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,2min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500萬。



上海牧榮生物科技有限公司

  1. 國內試劑耗材經銷代理。

  2. 國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。

  3. 提供加急物流處理,進口貨物,最快交期1-2周。

  4. 進出口貨物代理服務。

  5. 公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌:CELL DATA,Alamanda Polymers, cstti,Click Chemistry tools,Nanoprobes,Ancell,NANOCS,Ambeed, Inc,SPEED BioSystems, LLC,Tulip Biolabs, Inc,Torrey Pines Biolabs,magsphere ,FabGennix International ,paratechs,Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

  6. 質量保證,所有產品都提供售后服務。付款方式靈活。公司堅持“一站式"服務模式,為客戶全面解決實驗、生產、開發需求。公司整合國際與國內資源,加強網絡建設,提高公司內部運作效率,為客戶提供方便、快捷的服務。

  7. 公司突出創新思維,提高工作效能,減低運作成本,為客戶提供優惠的價格。

丙酮酸激酶(PK)測試盒




產品咨詢

留言框

  • 產品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
掃一掃,關注微信
地址:上海市嘉定區安亭鎮新源路155弄16號新源商務樓718室 傳真:Shanghai Mulong Biotechnology
©2024 上海牧榮生物科技有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2022017655號-1