對于細(xì)胞破碎建議:
大小
當(dāng)濕法珠磨時(shí)細(xì)菌,使用直徑為0.1毫米的玻璃珠。
當(dāng)濕法珠磨時(shí)酵母/真菌,使用直徑為0.5毫米的玻璃珠或氧化鋯/二氧化硅珠。
當(dāng)濕法珠磨時(shí)軟組織(如肝臟、大腦、肌肉),使用直徑為1.0毫米的玻璃珠或氧化鋯/二氧化硅珠。當(dāng)濕磨組織時(shí),樣品量超過幾十毫克時(shí),應(yīng)先預(yù)切碎成橫截面小于1毫米的碎片,然后再進(jìn)行研磨。
濕磨時(shí)堅(jiān)韌的組織(如結(jié)締組織、皮膚或“非木質(zhì)"植物材料),首先預(yù)切碎或低溫粉碎,并使用直徑為2.0毫米的氧化鋯珠。
使用時(shí)尤其是堅(jiān)韌或纖維組織,使用上面建議的相同尺寸的珠子,但選擇更致密的珠子材料。例如,使用氧化鋯-二氧化硅珠破碎孢子,或使用三個(gè)2.3毫米的鉻鋼珠提取堅(jiān)韌的纖維植物材料,如單子葉植物的葉子。
一磅重的瓶子里有多少顆珠子?
鉻鋼珠:
6.23毫米直徑~430
3.2毫米直徑~3300
2.3毫米直徑~7900
玻璃念珠:乘以3.2;氧化鋯-硅珠:乘以2.1;氧化鋯珠:乘以1.4
· 玻璃珠子的密度為2.5克/立方厘米,是用于“打珠"的最常見的珠子介質(zhì)。
· 氧化鋯/氧化硅珠子的密度為3.7克/立方厘米(比玻璃密度高50%——對孢子和大多數(shù)組織都有好處)。
· 碳化硅尖銳顆粒(不是珠子)的密度為3.2克/立方厘米(由于顆粒具有鋒利的切割邊緣,因此在堅(jiān)韌的組織樣本上可能會工作得更快。它們優(yōu)于較便宜的氧化鋯/二氧化硅珠的優(yōu)勢正在研究中。但請參見以下布雷因的評論。
· 石榴石(一種鐵鋁硅酸鹽,尖銳的顆粒)的密度為4.1克/立方厘米。像致密、邊緣鋒利的SiC顆粒一樣,它可以加速堅(jiān)韌組織的溶解。與SiC尖銳顆粒不同,石榴石顆粒在攪拌過程中會碎裂。當(dāng)對軟組織或含有細(xì)菌的糞便和土壤樣品進(jìn)行均質(zhì)化時(shí),這種特性會很有用。不需要混合珠子大小。從半充滿2毫米石榴石顆粒的微孔開始,樣品迅速分散。與此同時(shí),打珠產(chǎn)生了,原地,小得多的石榴石碎片可以有效地破壞微生物。
· 氧化鋯密度為5.5克/立方厘米(比玻璃密度高100%)-這種用于堅(jiān)韌組織的陶瓷珠具有化學(xué)惰性,不易破碎。
· 鉻鋼和不銹鋼密度為7.9克/立方厘米。這些重珠子通常用于干磨葉子和種子。根據(jù)珠子的大小,放置1到5個(gè)特殊的鋼珠增強(qiáng)型2毫升聚丙烯微孔管或者2毫升不銹鋼微型量具。當(dāng)與鋼珠一起使用時(shí),普通的螺旋蓋聚丙烯微閥可能會破裂或泄漏。鉻鋼珠通常是不銹鋼珠的良好替代品。雖然不銹鋼珠因其耐腐蝕性而經(jīng)常被選用,但鉻鋼珠并不昂貴...事實(shí)上,它們足夠便宜,可以用作“一次性用品",從而消除了清潔和交叉污染的擔(dān)憂。一個(gè)警告是:最終,鉻鋼珠與水介質(zhì)接觸會生銹。應(yīng)立即將它們從細(xì)胞裂解物中去除。訂購鉻鋼珠時(shí),BioSpec提供了一個(gè)小磁鐵,使這項(xiàng)工作變得輕松。
· 碳化鎢密度為14.9克/立方厘米。雖然密度很高,但這種珠子通常不用于生物制備,因?yàn)樗鼤箘驖{看起來“臟"。高重力離心將澄清勻漿,但這很耗時(shí)。上面列出的其他高密度介質(zhì)通常也能做得很好。
· 酵母和細(xì)菌的快速簡便接種.在固體營養(yǎng)培養(yǎng)基中加入十幾個(gè)直徑為6.3毫米的無菌玻璃珠。使用側(cè)向運(yùn)動(dòng)搖動(dòng)平板(或一疊平板),使添加的酵母和細(xì)菌懸浮液均勻分布在平板表面。在接種體滲透到培養(yǎng)基凝膠中后,可以通過翻轉(zhuǎn)平板并將珠子從蓋子中倒出來倒出珠子。
· 增加組織培養(yǎng)生長的表面積用直徑為6.3毫米的玻璃珠包裝滾筒瓶、試管或小瓶。在這種應(yīng)用中,珠粒應(yīng)緊密包裝,以防止珠粒在滾動(dòng)或搖動(dòng)過程中移動(dòng)。類似地,當(dāng)細(xì)胞在不激動(dòng)的培養(yǎng)瓶中,通過添加一層直徑為0.1 mm的珠子,可以更快地達(dá)到匯合,并提高細(xì)胞密度。
· 創(chuàng)造一個(gè)生物反應(yīng)器 通過用玻璃珠填充柱并接種選擇的表面粘附微生物或細(xì)胞。
· 保持透析管垂直 在透析過程中通過在密封前加入一些大玻璃珠或大理石。
· 納米技術(shù)。將堅(jiān)硬或易碎的顆粒研磨至亞微米尺寸。一篇簡短的評論“高科技球磨機(jī)推動(dòng)納米技術(shù)的進(jìn)步"包含了使用Retsch對納米顆粒進(jìn)行珠磨研磨的實(shí)用信息E-max™珠磨機(jī)MiniBeadbeater系列珠磨機(jī)將這種應(yīng)用擴(kuò)展到處理少量(《0.5克)貴重材料。
· 用于智能手機(jī)顯微鏡附件的鏡頭。可見
· 更換水在商業(yè)實(shí)驗(yàn)室浴池中鋁珠. 無需擦拭濕試管,無需試管翻倒,無需支架、浮子或砝碼。BioSpec產(chǎn)品的“微小淚珠"鋁珠可為試管提供熱傳遞性能。
· 來源于與基質(zhì)消化酶一起孵育的動(dòng)物組織的活單細(xì)胞產(chǎn)量提高.探索塑料微珠的新應(yīng)用。替換繁瑣的“手工研磨組織碎片通過用適當(dāng)?shù)拿赶M織的細(xì)胞外基質(zhì)而被溶解。
· Faster QuEchERS technique:使這一廣受歡迎的方案更快地從植物、動(dòng)物組織和食品中提取和分析小有機(jī)物(殺蟲劑、除草劑、藥物)。通過在提取管中加入一些直徑為2 -3 mm的玻璃珠并渦旋,將樣品水合和均質(zhì)化的時(shí)間縮短一半。或者,更好的方法是通過在迷你攪拌器中均質(zhì)化多個(gè)提取管來提高通量。