提取DNA后,大多數實驗的下一階段需要已知濃度作為輸入材料。有許多方法可以測量DNA濃度,例如紫外線吸收,熒光染料和電泳。
DNA分光光度計通常用于測量濃度,本文將概述它們的工作原理以及使用原因。
DNA分光光度計的用途是什么?
分光光度法是一種重要的方法,用于一系列生化實驗,包括DNA,RNA和蛋白質定量和質量控制。在這些應用中,樣品通常只能少量提供,最好進行無損分析。使用微量分光光度計(有時稱為納米體積或納米滴分光光度計)可最大限度地減少樣品定量的使用,通常只需要 1μL 樣品。
DNA分光光度計如何工作?
分光光度法是電磁光譜學的一種形式,涉及定量測量材料的透射或反射特性作為波長的函數。DNA分光光度計使用檢測器記錄一定波長范圍內的光束強度。
DNA分光光度計經常用于紫外線,紅外線和可見輻射,但是,它們也可以詢問電磁光譜的許多其他元素。波長范圍(可以通過測試樣品傳輸的顏色)是DNA光譜儀的一個重要特征。此外,樣品透射百分比、樣品吸收的對數范圍以及偶爾的反射率測量百分比是某些應用的重要特性。
在溶液中,DNA分光光度計可以測量堿基吸收的紫外線水平。DNA和其他核酸吸收峰值波長為260nm的光。吸收的光量與樣品中DNA的濃度成正比。濃度是使用比爾-朗伯方程根據透射光量計算的。為了用分光光度計定量DNA,應將DNA懸浮在溶劑中,并且分光光度計應用溶劑空白以校正任何背景吸光度。
分光光度計是極其精確、準確和復雜的設備,可用作實驗室中的臺式或模型,或便攜式進行現場工作。
DeNovix的DS-11系列在分光光度法領域具有革命性的性能。它結構緊湊且易于使用,能夠提供具有熒光功能的全光譜紫外-可見分光度計分析,這意味著它非常適合快速核酸和蛋白質定量。